细胞捕获组织微切割系统

应用困难：组织异质性对于检索细胞和区域特异性信息构成重要障碍，难以维持准确的下游分析。

我们的解决方案：细胞捕获组织微切割系统成功对于任何细胞培养或组织切片样品的荧光标记和形态学上不同的细胞中分离和组织显微切割，包括来自所有类型的粘附，悬浮和3D培养细胞，包括捕获或切割高难度的样品例如原代细胞或捕获单细胞在冷冻切片和蔗糖处理的复合组织，如脑切片：

1.单细胞收集和基于荧光的细胞收集：

•收集基于荧光或明场的细胞

•收集低丰度的标记细胞

•使用浓缩细胞GFP低转染率的细胞线

•用于下游单细胞分析，如NGS，转录组测序和Omics应用

2.转化体选择与浓缩，克隆扩增：

•从细胞培养物或再培养目的直接收集个体细胞

•选择性传代培养转染的细胞

•保持高细胞活力

•最大化难以转染细胞的效率

•从复杂混合物中分离亚群

•实现高质量的分离

3.组织显微切割：

•5〜300μm厚的显微切片

•提供微侵入性作业

•不需要预处理

•显微切割冷冻切片，蔗糖处理组织和活组织

•分离高质量的RNA，DNA和蛋白质

•收集单个细胞

•用于下游单细胞分析，如NGS，转录组测序和Omics应用

Cell Isolation Unit（CIU）是一种基于真空辅助毛细管单细胞收集和组织显微切割的仪器进行捕获细胞和组织获取（CTAS; USPT 8,797,644; Kudo等，2012），可以从细胞培养和组织中获取单个细胞。我们的专利真空冲击辅助收集允许从任何未处理的细胞培养物中快速获取单细胞而不影响其生存力，提供可靠且经济实惠的手段进行各种下游实验。可以收集少至15nl体积的单细胞用于进一步的全基因组分析或克隆扩增。细胞培养不需要特殊处理也不需要特定的外围设备，从而在实验设计和样品采集中实现无与伦比的灵活性。此外，该仪器适用于单个细胞收集和区域特异性获取复杂异质组织（如大脑）的亚解剖区域。系统的操作是直观的，需要最少的培训。

即使从收集的细胞和组织区域分离的RNA表现出高的完整性和低的降解率，RIN> 9.0。 随后的标记方案（例如基于T7）一致地产生高掺入产率，使其适用于下游PCR，微阵列和测序分析。

仪器的低成本，易用性，单细胞分辨率以及对细胞活力的最小影响使其成为独特而重要的研究工具。 重要的是，它是一个独立的仪器，可以安装在广泛的倒置显微镜型号，在实验室提供额外的灵活性。 系统的操作是直观的，需要最少的培训。

也许最明显的特征之一是CIU能够进一步收集活细胞重新培养和大量的下游功能研究。 单独的荧光标记和形态上不同的细胞可以从任何细胞培养物或组织切片获得。

其显着特点包括：

 - 简单的操作，最少的培训

 - 从未处理的培养物和组织切片收集单细胞

 - 高效的组织显微切割

 - 收集细胞的高活力

 - 高质量的RNA和蛋白质用于下游研究

 - 回缩功能 - 更容易使用多孔板

 - 重新校准功能 - 样品之间无重新校准

 - 侧面旋转头 - 用于处理DCU的人机工程学设计

 - 灵活性和多功能性 - 适用于大多数倒置显微镜，如现有的显微镜

 - 相比任何激光辅助显微切割仪器低得多的成本

规格：

 - 分离分辨率：单细胞

 - 校准功能：是的

 - 电源：输入100-240 V，50-60 Hz，1.5 A;输出+ 24 V，2.7 A

 - 照明：灯144 LED环形灯，输入24V DC

 - 真空范围：高达22“Hg

 - 使用方便的无菌可拆卸毛细管单元（Disposal Capillary Unit:DCU）：行程1.5μm，最大行程：23.3毫米

 - 可用的DCU ID，μm从10到100μm，最常见的DCU：ID = 20μm; 6个单位/箱，DCU：ID =30μm; 6个单位/箱，DCU：ID =50μm; 6个单位/箱，DCU：ID =70μm; 6单位/箱

 - 固定器：25mm载玻片，35mm培养皿和多孔板6-,12-，24-6-，12-，24-，48-，96-

 - 真空持续时间（Ts），秒：0.1至1.0秒

 - 真空强度，-mm Hg：111.8至558.8 Hg

 - 采集速度（-mm Hg / Ts），秒

 - 最小设置：（111.8 / 0.1秒）1.3秒

 - 最大设置：（558.8 / 1.0秒）2.2秒

 - 提取样品体积（从最低到最高设置）：DCU20（μm）10 nl至2.5μl，DCU30（μm）35 nl至3.0μl，DCU40（μm）70 nl至5.0μl

 - 组织切片的收集速度（细胞/分钟）：大鼠浦肯野细胞（小脑）12.0±1.5c / min，小鼠前角运动神经元12.0±1.5c / min

 - 来自贴壁细胞培养物的细胞收集速度（细胞/分钟）：SH-SY5Y人成神经细胞瘤细胞系高达25c / min，中国仓鼠卵巢细胞（CHO）高达25c / min

Cell Isolation Unit Plus（CIU +）是组织显微切割，单细胞获取和收集细胞发放到单个孔中用于进一步分子分析或克隆扩增的通用平台。主要工作原理是基于毛细管真空脉冲辅助技术（CTAS; Kudo等，2012）。开发的系统可以显微切割组织切片，从小于15nl体积的标准细胞培养皿中生长的任何贴壁培养物收集和发放单个细胞，与各种下游单细胞分析和下一代测序相容。像CIU一样，该系统可以用于各种倒置显微镜。其优点包括成本效益，简单的操作，数字界面，从单细胞隔离到下游分析的完整工作流程，与广泛的倒置显微镜的兼容性以及标准板和培养皿的使用。

CIU +功能与规格：

 - 与广泛的倒置显微镜兼容

 - 全功能数字控制，功能相当于CIU

 - 一个按钮直观校准

 - 多达48个样品的收集和发放

 - 通用样品台配器：允许以多种配置收集和发放样品 - 从载玻片到载玻片，多孔板到多孔板，载玻片到多孔板，璃片细胞室或多孔板到PCR管，8管条或48孔板

 - 接口：数字

 - 压力：5 PSI

 - 真空度：10 PSI

 - 脉冲持续时间0.1〜1.0秒

 - 样品相容性：粘附细胞，悬浮细胞，3D培养物，天然的，新鲜冷冻的，蔗糖处理和固定组织

 - 分辨率：单细胞培养和20微米组织切片

 - 收集细胞的可靠性：高达95％*

 - 可用DCU ID：10至100μm，行程步长1.5μm

 - 规格支架：25 mm滑块，35 mm和50 mm培养皿，48个PCR管座

 - 发放量：最多48个样品

 - 收集量：DCU20μm - 10 nl至2.5μl，DCU30μm - 35 nl至3.0μl，DCU40μm - 70 nl至5.0μl

 - 收集速度组织部分 - 高达12个细胞/分钟，细胞培养物 - 高达25个细胞/分钟

 - 显微镜兼容性广泛的倒置显微镜